Laboratóriumi Eredmények: In-situ-hibridizáció (ISH)

2023 Szerző: Wallace Forman | [email protected]. Utoljára módosítva: 2023-05-24 12:25

Laboratóriumi eredmények: In-situ-hibridizáció (ISH)

Az in situ hibridizáció - más néven FISH (fluoreszcencia in situ hibridizáció) vagy CISH (kromogén-in-situ hibridizáció) - egy speciális orvosi-diagnosztikai eljárás, amelyben a testsejtek vagy szövetek genetikai anyagát vizsgálják. Különösen ezzel a vizsgálati módszerrel az emberi genetikai anyag (DNS) változásai felhasználhatók az örökletes, fertőző és daganatos betegségek tisztázására.

Az in situ hibridizáció fő alkalmazási területe a veleszületett, genetikai betegségek, a sejtek és szövetek vírusfertőzései, rosszindulatú daganatos betegségek, leukémia (a vér és a csontvelő rosszindulatú betegségei) és rosszindulatú limfómák (a nyirokrendszer rosszindulatú betegségei) összefüggésében végzett további diagnosztikai munka.

navigáció

• olvasson tovább
• többet a témáról
• Tanácsok, letöltések és eszközök
• Mi az in situ hibridizáció (ISH) laboratóriumi eljárása?
• Hogyan működik a FISH vizsga?
• Mely betegségek esetén végeznek ISH-vizsgálatot?

Mi az in situ hibridizáció (ISH) laboratóriumi eljárása?

Az in situ hibridizáció egy speciális orvosi diagnosztikai eljárás, amelynek során a testsejtek vagy szövetek genetikai anyagát közvetlenül ezeken a struktúrákon vizsgálják.

A genetikai anyag alapja egy speciális, nagyon összetett és hosszú láncú molekula:

a "DNS" (dezoxiribonukleinsav)

Emberben a kettős szálú DNS-ből (két komplementer szál) álló genetikai anyag az összes testsejt magjában található, ahol az egyén összes testsejtje azonos genetikai anyaggal rendelkezik. Ezenkívül az egyes személyek genetikai összetételének pontos összetétele egyedi - összehasonlítható az ujjlenyomattal, amely szintén egyedi minden ember számára.

Emiatt a genetikai anyagot is nevezik

úgynevezett „genetikai kód”, mert egy személy minden teststruktúrájának tervét úgymond titkosítják, feltérképezik, tárolják és ezt követően továbbadják

A test sejtjeinek sejtmagjain belül a DNS egy speciális sorrendben ismert

• A "kromoszómákat" (örökletes testeket) nevezzük. A kromoszómák mindig párban fordulnak elő az emberi test sejtjeiben, az egyiket az anyától, a másikat az apától örökölték. Ebben az értelemben az összes emberi testsejt összesen 46 kromoszómát tartalmaz - 22 pár úgynevezett autoszómát és egy pár úgynevezett nemi kromoszómát.

• Maguk a kromoszómák nagyrészt DNS-ből állnak, a DNS-szekvencia egyes szakaszait „géneknek” nevezik, feltéve, hogy a test felépítése és működése szempontjából meghatározott funkcióhoz rendelhetők. Az összes gén összegét hívjuk

  Az emberi lény "genomja"

Az in situ hibridizáció laboratóriumi folyamatának segítségével a genom egyes régiói közvetlenül láthatóvá válnak a sejtekben és szövetekben. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyagot (DNS) közvetlenül a sejtek magjában teszik láthatóvá, majd mikroszkóp alatt vizsgálják és értékelik. Ennek a laboratóriumi eljárásnak az elve származik:

Az „in-situ” jelentése: „közvetlenül a vizsgálandó struktúrában”

Hogyan működik a FISH vizsga?

Az in situ hibridizáció végrehajtásához a következő összetevők szükségesek:

• megfelelő vizsgálati anyag (sejt- vagy szövetminták),
• - megfelelő berendezés az ISH - készítmények előállításához, és -
• detektáló rendszer (mikroszkópos rendszer) a genetikai anyag megjelenítésére (láthatóvá tételére) a sejtmagokban.

A vizsgálati anyag megszerzése után a sejt- vagy szövetanyagot fel kell dolgozni:

• A sejt anyagát vékony üveglemezekre (mikroszkóp tárgylemezekre) vékonyan elosztjuk.
• A szövetminták esetében szövettani előkészítési technikákat alkalmaznak vékony metszetű minták előállítására, amelyeket mikroszkóp tárgylemezekre is alkalmaznak.

Ezeket az előállítási lépéseket követve, denaturálási lépéseket követve egyszálú DNS előállításához, a készítményeket ún

A „génszondák” - ezek szintén denaturált, egyszálú DNS-szekvenciák, amelyek a célszekvenciákhoz kapcsolódnak (ha vannak a vizsgálati anyagban) - más szóval: „hibridizálódnak”

Annak érdekében, hogy a hibridizációs termékeket utólag láthatóvá lehessen tenni az értékeléshez, a DNS-próbákat közvetlenül vagy közvetve speciális festékekkel jelöljük. A festékekkel van

• egyrészt fluoreszcencia festés, amelynek során speciális fluoreszcens mikroszkópokat kell használni a megfelelő készítmények értékeléséhez. Emiatt ezt a festési módszert is nevezik

  Fluoreszcencia in situ hibridizációt (FISH) jelöl

• másrészt a DNS-próbákat egyszerű kromogénekkel (festékekkel) is lehet festeni, és az így készített készítmények megjelenítéséhez és értékeléséhez elegendő egy egyszerű fénymikroszkóp. Ezt a technikát ún

  Chromogen In situ hibridizáció (CISH)

Mely betegségek esetén végeznek ISH-vizsgálatot?

Az in-situ hibridizáció fő alkalmazási területe a további tisztázás a

• veleszületett, genetikai betegségek,
• Sejtek és szövetek vírusfertőzései,
• rosszindulatú daganatos betegségek,
• A leukémia (a vér és a csontvelő rosszindulatú betegségei) is
• malignus lymphoma (a nyirokrendszer rosszindulatú betegsége).

Mivel a sejt- vagy szövetmintákat vizsgált anyagként in situ hibridizációban elemzik, ez a laboratóriumi eljárás csak megfelelően felszerelt citológiai vagy szövettani laboratóriumi létesítményekben hajtható végre.

A rákkal kapcsolatos további információkért lásd: Rák.